당단백질 분자량 측정을 이용한 실시간 당쇄화 모니터링 방법

당단백질 분자량 측정을 이용한 실시간 당쇄화 모니터링 방법

출원번호 : 10-2016-0033435 (출원일: 2016-03-21)

등록번호 : 10-1743969 (등록일: 2017-05-31)

특허권자 : 충남대학교산학협력단

요약 : 해결하려는 과제: 바이오의약품 생산공정 등에서 실시간으로 빠르게 당사슬을 스크리닝할 수 있는 방법이 필요하다. 과제 해결방법: 본 발명은 당단백질의 전분자량 또는 당사슬 제거 후 단백질의 분자량 측정을 통해 당사슬의 조성과 당사슬 변이체를 포함한 다양성 및 각 당자리 점유율, 당쇄화 유무, 당사슬 질량값 함유율까지 실시간으로 확인할 수 있는 당쇄화 모니터링 방법을 제공한다.

대표청구항 : a) 질량분석기를 이용하여 단백질의 전분자량을 측정하는 단계;b) 상기 a) 단계의 결과, 질량값이 단일 피크를 보이면 당이 결합되지 않은 단백질로 판단하며, 두 개 이상의 피크를 나타내며 각 피크 간 값의 차이가 162.14 (헥소스), 203.19 (HexNAc), 146.14 (퓨코스), 291.25 (NeuAc) 및 307.25 (NeuGc) 중 하나의 질량값 또는 두 개 이상의 질량값의 합을 나타내는 경우 당단백질로 판단하는 단계;c) 상기 b) 단계에서 단백질이 당단백질로 판단되면, 효소 처리를 통해 N-당사슬을 제거하고, N-당사슬이 제거된 단백질의 분자량을 측정하는 단계; 및d) 상기 c) 단계에서 질량값이 단일 피크를 보이면 N-당사슬만 결합된 당단백질로 판단하고, a) 단계에서 측정한 전분자량과 c) 단계에서 측정한 N-당사슬이 제거된 단백질의 분자량 차이를 이용하여 N-당사슬의 조성을 결정하는 단계;를 포함하는 당단백질 분자량 측정을 이용한 실시간 당쇄화 모니터링 방법.

상세링크 : http://newsd.wips.co.kr/wipslink/api/dkrdshtm.wips?skey=3517234000978