목적하는 단백질 발현 수준을 제공하는 초기 코돈의발굴방법, 및 이를 이용한 재조합 단백질의 발현 조절 방법및 생산 방법

목적하는 단백질 발현 수준을 제공하는 초기 코돈의발굴방법, 및 이를 이용한 재조합 단백질의 발현 조절 방법및 생산 방법

출원번호 : 10-2008-0022217 (출원일: 2008-03-10)

등록번호 : 10-0961565 (등록일: 2010-05-27)

특허권자 : 충남대학교산학협력단

요약 : 본 발명은 유전자의 초기 코돈(initial codon), 즉 +2 내지 +13 코돈 중 하나 이상,　특히 +2 및 +3 코돈을 무작위로 변화시킨 후 이들을 세포 내로 도입하여 개별 유전자로 분리하고 콜로니 PCR에 의해 증폭한 후, 무세포 단백질 합성 시스템을 이용하여 각각의 유전자를 단백질로 발현시킴으로써, 목적하는 단백질 발현 수준을 제공하는 초기 코돈을 발굴하는 방법, 및 이를 이용한 재조합 단백질의 발현 조절 방법 및 생산 방법에 관한 것으로서, 단백질 생산에 있어 체계적이고 정확한 조절 수단이 될 수 있으며, 활성 단백질을 원하는 수준으로 고속으로 발현할 수 있다.

대표청구항 : 1) 목적 유전자를 +2 내지 +13 코돈 중 하나 이상의 위치에서 무작위로 변화된 축퇴 정방향 프라이머(degenerate forward primer)를 이용하여 PCR(polymerase chain reaction)에 의해 증폭시켜 +2 내지 +13 코돈 중 하나 이상의 위치에서 무작위로 변화시키고; 2) 단계 1)의 무작위로 변화된 유전자를 각각 세포 내로 도입하여 개별 유전자로 분리한 후, 콜로니 PCR(polymerase chain reaction)에 의해 증폭하고; 3) 단계 2)의 유전자로부터 무세포 단백질 합성(cell-free protein synthesis)을 수행하고; 4) 단계 3)에서의 단백질 발현효율을 조사하여 원하는 단백질 발현 수준을 제공하는 코돈을 선별하는: 단계를 포함하는, 목적 단백질에 대해 원하는 발현 수준을 제공하는 초기 코돈의 발굴방법.

상세링크 : http://newsd.wips.co.kr/wipslink/api/dkrdshtm.wips?skey=3510054001240