무세포 단백질 합성 시스템을 이용한 면역 어세이 신호증폭 방법 및 이의 용도
출원번호 : 10-2018-0164950 (출원일: 2018-12-19)
등록번호 : 10-2085636 (등록일: 2020-03-02)
특허권자 : 충남대학교산학협력단
요약 : 본 발명은 무세포 단백질 합성 시스템을 이용한 면역 어세이 신호증폭 방법 및 이의 용도에 관한 것으로, 상세하게는 항원항체 반응에서 검출을 위해 접합하는 리포터 단백질(효소) 대신에 이를 번역할 수 있는 DNA를 접합시킨 후, 항원항체 반응 후, 무세포 단백질 합성을 통해 다량의 단백질로 합성함으로써 검출 민감도를 향상시킬 수 있는 방법에 관한 것이다.
대표청구항 : (1) 1차 항체를 지지체에 고정하는 단계; (2) 상기 단계 (1)에서 고정된 1차 항체와 반응하는 항원을 포함하는 시료를 첨가하여 항원항체 반응을 수행하는 단계;(3) 상기 항원항체 반응한 항원에, 리포터 단백질을 코딩하는 이중나선 DNA가 접합된 2차 항체를 결합시키는 단계;(4) 상기 단계 (3) 이후에, 2차 항체에 접합된 DNA를 주형으로 하고, RNase E가 결핍된 대장균 추출물을 반응액으로 이용하며, 마그네슘 이온의 농도가 6~10mM이고, 반응온도가 15~25℃이며, 반응시간이 3~6시간인 조건으로, 가용성 단백질의 함량을 증진시키는 것을 특징으로 하는 무세포 단백질 합성을 수행하는 단계; 및(5) 상기 무세포 단백질 합성법으로 합성된 리포터 단백질을 분석하여 항원을 검출하는 단계;를 포함하는 신호가 증폭된 발현 면역 어세이 방법.
상세링크 : http://newsd.wips.co.kr/wipslink/api/dkrdshtm.wips?skey=3520112001196
