무세포 단백질 합성 방법을 이용하여 생산된 항체의 세포질 내로의 유입을 간편하게 분석하는 방법

무세포 단백질 합성 방법을 이용하여 생산된 항체의 세포질 내로의 유입을 간편하게 분석하는 방법

출원번호 : 10-2016-0062879 (출원일: 2016-05-23)

등록번호 : 10-1667023 (등록일: 2016-10-11)

특허권자 : 충남대학교산학협력단

요약 : 본 발명은 무세포 단백질 합성 방법을 이용하여 생산된 항체의 세포질 내로의 유입을 간편하게 분석하는 방법에 관한 것으로, 세포 내 단백질과 이들의 상호작용을 표적으로 하는 신규 항체들의 개발에 유용하게 이용될 수 있다. 또한, 본 발명을 통해 쪼개진 GFP 상보성(split GFP complementation)을 기반으로 하여 시간 소모적인 다단계 염색 절차 없이 세포질 내로 항체 전달을 확인하는데 필요한 시간을 단축시켜 세포질 내 유입 여부를 간편하고 신속하게 분석할 수 있을 뿐만 아니라, 무세포 단백질 합성으로 생산된 항체를 정제하지 않고 바로 분석에 이용할 수 있는 이점이 있다.

대표청구항 : (a) Factor Xa를 포함하는 무세포 단백질 합성 반응액에 합성 주형으로서 5’에서 3′ 방향으로 프로모터; 유비퀴틴; Factor Xa 절단 부위; 중쇄 가변 영역 및 세포막 투과성 경쇄 가변 영역이 도입된 경쇄 가변 영역으로 이루어진 scFv 항체; GFP11 및 스트렙트아비딘(streptavidin) 결합 펩티드를 코딩하는 서열; 및 터미네이터가 작동가능하게 연결된 유전자를 첨가하여 항체를 생산하는 단계; 및(b) 상기 생산된 항체를 GFP1-10를 발현하는 동물세포에 처리하여 동물세포의 세포질 내에서 GFP 형광을 검출하는 단계;를 포함하는 무세포 단백질 합성 방법을 이용하여 생산된 항체의 세포질 내로의 유입을 간편하게 분석하는 방법.

상세링크 : http://newsd.wips.co.kr/wipslink/api/dkrdshtm.wips?skey=3516432001218